20 |
Klinisk Biokemi i Norden · 1 2016
För forskningsändamål förvaras ofta CSV under
lång tid i -80°C-frys. Eftersom kvaliteten på förslut-
ningarna torde variera kan säkerligen stora variatio-
ner i pH uppstå. Vi har inte gjort någon systematisk
undersökning av detta. Ett speciellt problem är att
kolsyresnö ofta förvaras i -80°C-frysar för senare
användning i experiment och i försändelser. I sådana
fall kan atmosfären i frysen närma sig 100 % CO
2
.
Vi testade effekten av ett års förvaring i sådan frys
på två 3,5 ml rör med påsatt kork innehållande 1 ml
CSV. PH i rören blev 6,3 och 4,3. Skillnaden mel-
lan rören reflekterar sannolikt olika effektivitet hos
förslutningen.
Diskussion
I många laboratorier används 10 ml-rör för CSV.
Denna lilla studie visar att man med sådana rör som
hanteras, vänds och öppnas några gånger snabbt
kommer över pH 8. När infrekventa specialanalyser
ska utföras, eventuellt efter att proven skickats, torde
ökningarna bli än större. Betydelsen av detta har inte
varit föremål för särskilt många undersökningar.
Man kan föreställa sig att immunologiska analyser
med exempelvis ELISA skulle kunna påverkas av
stora variationer i pH, om inte metoden är buffrad
för att motverka effekten av pH-variation. Stabili-
teten hos komponenter i proven borde också kunna
påverkas. Vi har noterat stora effekter i samband
metabolomiska analyser (det var så vi blev varse
problemet) (3). Andra har också uppmärksammat
påverkan av den stora pH-ökningen (4). I vår forsk-
ning med metodutveckling av CSV-analyser buffrar
vi numera alltid proven. Den ökade lysen av röda
blodkroppar komplicerar bedömningen av cerebrala
blödningar (1). Det är känt att leukocyter har en
tämligen låg stabilitet i tappad CSV (5). Ökningarna
i pH kanske bidrar till detta problem, men inga
systematiska undersökningar tycks finnas gjorda.
En slutsats av undersökningen är att CSV ska tap-
pas i minsta möjliga rör som praktiskt kan användas
vid lumbalpunktioner, och att de snarast ska förslu-
tas effektivt. Kanske borde neutral buffert snarast
sättas till tappad CSV, eller finnas redan i röret. Ser
SFKK, NFKK eller EQUALIS något behov av att
utarbeta anvisningar anpassade både för behoven
vid lumbalpunktion och vid provens hantering på
laboratoriet?
Referenser
1. Christensen RS et al. Unrecognized preana-
lystical problem with the spectrophotometric
analysis of cerebrospinal fluid for xantochro-
mia. Clin Chem 2008;54:1924-5.
2. Cunniffe JG et al. Effect of pH changes in
cerebrospinal fliud specimens on bacterial
survival and antigen test results. J Clin Pathol
1996;49:249-53.
3. Wuolikainen A et al. Optimization of pro-
cedures for collecting and storing of CSF for
studying the metabolome in ALS. Amyotrophic
Lateral Sclerosis 2009;10:229-36.
4. Cruz T et al.
1
H NMR analysis of cerebrospi-
nal fluid from Alzheimers disease patients: an
example of possible misinterpretation due to
non-adjustment of pH. Metabolites 2014;4:115-28.
5. Li A et al. Automated white blood cell counts in
cerebrospinal fluid using the body fluid mode
on the platform Sysmex XE-5000. Scand J Clin
Lab Invest 2014;74:673–80.
Foto: Henrik Alfthan.
