![]()
30
| 4 | 2005
Klinisk Biokemi i Norden
rationens bestämningar. Däremot vet man att cTnI
bestämningar kan ge stora skillnader i resultat bero-
ende på vilken metod som används, eftersom den
immunologiska detektionen av cTnI försvåras av en
mängd faktorer. Bindingen av antikroppar till cTnI
kan påverkas av konformationsförändringar, post-
translationell modifiering och makromolekyler som
blockerar antikropparnas epitoper på cTnI. Förutom
specifika problem för cTnI kan cTnI bestämningar,
liksom de flesta andra immunologiska bestämnin-
gar, påverkas av interferens från t.ex. heterofila
antikroppar.
Heterogenitet
Som beskrevs i stycket ovan, kan cTnI existera i
en mängd olika former i blodomloppet. Helst borde
antikropparna som används för detektion ekvi-
molärt känna igen alla former av cTnI. Man vet
dock att bildning av cTnI-TnC komplexet påverkar
detektionen hos en del monoklonala antikroppar. En
del detekterar endast cTnI i komplex med TnC eller
känner bättre igen den komplexerade formen (13),
medan andra detekterar endast fritt cTnI eller har en
högre reaktivitet för den fria formen
(3)
. Flera studier
har visat att det finns skillnader i detektionen av
fritt och komplexbundet cTnI hos en del kommer-
siella cTnI metoder (4, 14, 15). Eftersom både den
amino- och den karboxyterminala delen av cTnI
lätt kan spjälkas av proteaser, har IFCC:s kommitté
rekommenderat användning av antikroppar mot
den stabila delen av cTnI, d.v.s. aminosyraresterna
30-110
(16)
, och de flesta kommersiella metoderna
använder antikroppar mot epitoper i denna del (17).
Fosforylering kan också påverka interaktionen med
cTnI hos en del antikroppar, men dess inverkan på
kommersiella metoder har inte studerats i någon
högre grad. Man vet att en del cTnI metoder påver-
kas olika av en möjlig oxidation av SH-grupper (4),
men eftersom det är oklart om cTnI vanligen finns i
reducerad eller oxiderad form i blodomloppet är det
svårt att utvärdera vikten av denna observation. En
sammanfattning över vilka delar av cTnI som kan
påverkas av olika modifieringar visas i Figur 1.
Interferens
Preanalytiska faktorer kan påverka detektionen
av cTnI. Serum används ofta för immunlogiska
bestämningar, men användning av plasmaprov
kan vara mera praktisk eftersom tiden som behövs
för koagulering av serum kan elimineras. Det mest
lockande alternativet för snabb bedömning av AKS
patienter när det gäller val av provtyp är helblod,
eftersom det eliminerar behovet av koagulering
och centrifugering. Både heparin och EDTA som
används som antikoagulanter i plasmaprov kan
störa detektion av cTnI. Eftersom cTnI är ett basiskt
protein med en positiv laddning vid fysiologiskt
pH-värde kan det dra till sig negativt laddade mole-
kyler, såsom heparin. I en del cTnI analysmetoder
har tillsats av heparin ingen effekt på antigen-anti-
kroppsreaktionen (12, 18, 19), medan andra meto-
der kan ge lägre (20-23) eller högre (24) koncentra-
tioner i heparinplasma än i serum. Användning av
EDTA som antikoagulant kan störa interaktionen
mellan cTnI och TnC, eftersom kalcium som sta-
biliserar komplexet binds av EDTA. Detta kan i sin
(Fortsat fra side 30)
Figur 1. Översikt över delar av cTnI som påverkas av
olika modifieringar som ger upphov till stor heterogenitet
hos cTnI i blodomloppet.
