![]()
29
| 4 | 2005
Klinisk Biokemi i Norden
formerna mycket homologa. En gen kodar för iso-
formen i långsam skelettmuskel och i hjärtmuskel
(18,4 kDa), medan den andra kodar för isoformen
som uttrycks i snabb skelettmuskel.
Frisättning av troponin till blodomloppet
Hastigt försämrat eller totalt blockerat blodflöde i
något av hjärtats kranskärl till följd av ruptur eller
fissur av ett aterosklerotiskt plack och påföljande
trombosbildning leder till myokardischemi i det
drabbade området. Beroende på graden och var-
aktigheten av förloppet, kan resultatet vara hjärt-
muskelnekros, d.v.s. hjärtinfarkt. Cellnekros leder
till upplösning av cellmembranen och läckage av
intracellulära proteiner som så småningom frisätts
till blodomloppet och sedan kan detekteras med
hjälp av immunologiska test. De proteinmarkörer
som först kan detekteras i blodomloppet är protei-
ner som finns i hög koncentration i cytoplasman,
medan strukturella proteiner frisätts långsammare
och sålunda kan detekteras endast med en viss för-
dröjning efter cellnekros. Majoriteten av cTnI och
cTnT finns strukturellt bundna till den kontraktila
apparaten i motsats till t.ex. myoglobin som främst
finns i cytosolen. Uppskattningsvis mindre än 10%
av cTnI och cTnT finns i cytosolisk form. Man antar
att de cytosoliska formerna är de första som kan
detekteras i blodomloppet efter en hjärtinfarkt, och
att den långvariga förhöjningen av troponin beror
på fortsatt nedbrytning av den strukturellt bundna
komponenten. Troponin kan vanligen detekteras
omkring 4 timmar efter att symtomen börjat och
kan vara förhöjt upp till 10 dygn eller längre bero-
ende på infarktens storlek. Olika modifieringar
kan påverka troponinkomplexet, antingen redan i
hjärtmuskeln före frisättning eller efter frisättning
till blodomloppet. Således kan en mängd olika
molekylära former hittas i cirkulationen. I följande
stycken beskrivs främst olika former av cTnI.
Flera forskningsgrupper har visat att största delen
av cTnI, mer än 90%, frisätts i komplex med TnC
(3-5). Förhållandet mellan totalt och fritt cTnI kan
variera med tiden och mellan olika patienter. Enligt
vissa rapporter kan också komplexet med alla tre
subenheter frisättas.
cTnI molekylen kan lätt nedbrytas av proteaser,
t.ex. µ-calpain. Fosforyleringstillståndet hos cTnI
påverkar nedbrytningshastigheten så att fosfory-
lering med protein kinas A gör cTnI mera resistent
mot nedbrytning, medan fosforylering med protein
kinas C ökar nedbrytningen (6). Det förekommer en
del avvikande rapporter i litteraturen när det gäller
vilka delar av cTnI som är mest känsliga för degra-
dering. Katruhka et al. (7) fann att de amino- och
karboxyterminala delarna var extremt instabila och
snabbt degraderades när nekrotisk hjärtmuskelväv-
nad inkuberades vid 37°C. Den centrala delen av
cTnI befanns vara stabilare och förblev intakt även
efter inkubering i 20 timmar. Den högre resistensen
mot degradering i denna del av cTnI tros vara en
konsekvens av dess interaktion med TnC, som ver-
kar skydda mot proteolys. Morjana (8) har rapporte-
rat att merparten av cTnI i blodet hos patienter med
hjärtinfarkt var degraderat både från amino- och
karboxyterminalen, vilket gav upphov till två frag-
ment på 14 respektive 18 kDa. McDonough et al. (9)
identifierade upp till sju olika fragment i biopsier
från bypass-opererade patienter. Främst kunde ett
22 kDa fragment med karboxyterminal degradering
vid position 192 detekteras, men olika fragment
med molekylvikter mellan 9 kDa och 22 kDa detek-
terades också. Fragmentet på 22 kDa, såväl som
intakt cTnI kunde också detekteras i serum från
samma patienter. I en färsk undersökning publi-
cerad av Law et al. (10), degraderades aminoter-
minalen först, följd av senare förlust av sekvenser
vid C-terminalen. Det har föreslagits att skillnader
mellan patienter och mellan olika sjukdomstillstånd
i hjärtat kan ge upphov till olika modifieringar av
cTnI, vilka i sin tur kan erbjuda insikter i den pato-
fysiologiska processen vid AKS (11).
En del av både intakt och modifierat cTnI i
serum från hjärtinfarktspatienter har visats vara
fosforylerat (11, 12), men fosforyleringsgraden och
vilka aminosyrarester som är fosforylerade är ännu
oklara. Man vet inte heller huruvida cysteinresterna
vid position 79 och 96 är oxiderade eller reducerade
i cTnI som frisätts till blodomloppet.
Immunologisk detektion av cTnI
Det finns mer än 20 tillverkare av cTnI bestämnin-
gar på marknaden, medan det p.g.a. patentrestrik-
tioner finns bara en tillverkare av cTnT bestämingar
(Roche Diagnostics). Detektion av cTnT har därför
inte studerats i särskild hög grad, förutom en del
jämförelser mellan första, andra och tredje gene-
(Fortsætter side 30)
