![]()
28
| 2 | 2007
Klinisk Biokemi i Norden
29
| 2 | 2007
Klinisk Biokemi i Norden
Avdeling for klinisk kjemi og
nukleærmedisin ved Akershus
universitetssykehus akkrediterte
i 2005 analysene manuell og
instrumentell telling av lymfo-
cytter, monocytter, nøytrofile-,
eosinofile- og basofile granulo-
cytter. Å akkreditere differensi-
altelling av leukocytter ble en
faglig utfordring blant annet
fordi instrumententleverandøren ikke tilbød kom-
mersiell kalibratorer for kalibrering av disse cel-
letellingene, men viste til manuelle tellinger og
NCCLS Dokument H20-A (1) når de oppga sporbar-
het for tellingene. Manuelle differensialtellinger
måtte derfor innlemmes i akkrediteringsomfanget.
Manuell differensialtelling av leukocytter:
Prosedyrer for tillaging, farging, mikroskopering,
vurdering, svarrapportering og arkivering av blo-
dutstryk ble skrevet og i tillegg ble det utarbeidet
systemer for kvalitetssikring, kvalitetskontroll og
opplæring og godkjenning av bioingeniører (1,2,3).
Akkreditering av differensialtellinger
Heidi Eilertsen
Avdeling for klinisk kjemi og nukleærmedisin
Akershus universitetssykehus
E-post: heei@ahus.no
Alle prosedyrene ble lagt inn sykehusets dokument-
styringssystem for å være lett tilgjengelige for alle
brukere.
Opplæring av bedømmere
Manuell metode stiller særlige krav til bedøm-
mernes kompetanse fordi det i tillegg til celletel-
lingene også skal gjøres vurderinger av cellene.
Kompetanse etableres gjennom en kombinasjon av
veiledet undervisning og selvstudium, der under-
visningen gis av bioingeniører med spesialkompe-
tanse. For å harmonisere oppfattelsen og karakteri-
seringen av cellene og for å lette opplæringen, ble
det utarbeidet et altlas der ulike celler, cellerekker
og typiske blodbilder beskrives med ord og bil-
der. Kompetansen bygges i to nivåer og til hvert
nivå er det laget opplæringsplan og flere sett med
opplæringskassetter som inneholder representative
utstryk.
Nivå 1 er grunnopplæring hvor det gis opplæring
i metode og basal morfologi som kvalitativ/kvan-
titativ vurdering av erytrocytter, trombocytter og
leukocytter. Opplæringen omfatter også cellerek-
keutvikling av den myelogene rekke. Etter endt
opplæring skal medarbeiderne kunne beskrive og
differensialtelle ”normale” utstryk, samt gjenkjen-
ne patologiske blodbilder og identifisere kronisk
lymfatiske leukemier, bakterie-/virusinfeksjon og
jernmangelanemi.
Nivå 2 er en påbygging hvor det gis utvidet opp-
læring i erytrocytt-/leukocyttmorfologi og utvidet
identifisering av patologiske celler. Medarbeiderne
skal etter å ha gjennomført trinn 2 også kunne
identifisere patologiske blodbilder som akutte leu-
kemier, myelo-/lymfopro-liferative sykdommer,
anemier osv.
Godkjenning av bedømmere
Begge opplæringstrinnene avsluttes med en test.
Det er til hvert nivå utarbeidet fem identiske test-
kassetter, som inneholder ti ulike, representative
preparater. Utstrykene i testkassetten er anonymi-
sert og de telles, vurderes og beskrives individuelt.
Testresultatene bearbeides, vurderes og dokumen-
teres av seksjonsansvarlig bioingeniør i samarbeid
med spesialbioingeniør i morfologi. Kvalitetsmålet
for differensialtellingen er at en testpersons indi-
viduelle celletellinger ikke skal avvike mer enn
innenfor 95% konfidensintervallet (4) fra gjen-
nomsnittsverdien for hver celletype. Viktige funn
skal angis for alle utstrykene. Ved utilfredsstillende
resultater må ytterligere opplæring gis og ny test
gjennomføres før eventuell godkjenning.
Kvalitetskontroll
Til internkontrollprogrammet lages det nye blod-
utstryk til hvert nivå hver tredje måned. Det lages
ett preparat til hver godkjent bedømmer. En tredel
av bedømmerne differensialteller og vurderer pre-
paratet per måned slik at hver bedømmer deltar i
programmet fire ganger per år. Blodbildet varieres
fra gang til gang og resultatene bearbeides, vurde-
res og dokumenteres av seksjonsansvarlig bioinge-
niør i samarbeid med spesialbioingeniør i morfo-
logi. Kontrollsystemet dokumenterer kompetanse
og baserer seg på at individuelle celletellinger ikke
avviker mer enn innenfor 95% konfidensintervallet
fra gjennomsnittsverdien for hver celletype (fig 1)
og at viktige funn angis for alle utstrykene.
Laboratoriet deltar i eksternkontrollprogram fra
Labquality. Labquality sender ut utstryk to ganger
per år, tre utstryk hver gang. Resultatene fra hver
utsendelsesomgang vurderes og dokumenteres.
Nøytrofile granulocytter
wbc>3.0 og morfologiflagg
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
manuell telling
Figur 1. Individuelle telleresul-
tater av myelocytter fra ulike
bedømmere i ulike kontroll-
preparater fra samme prøve i
forhold til gjennomsnittsverdien
av kontrollresultatene (x). 95%
konfidensintervall for manuell
differensialtelling (100 celler)
er angitt.
Figur 2. Sammenligning av
manuell differensialtelling (100
celler)(x) med instrumentell
differensialtelling XE-2100
(y). 95% konfidensintervall
for manuell differensialtelling
(100celler) er angitt.
CV
total
100 celler
1 blodutstryk
CV
total
200 celler
1 blodutstryk
CV
total
200 celler
2 blodutstryk
Nøytrofile
9,3
7,6
6,8
Lymfocytter
17,4
14,1
12,5
Monocytter
33,4
26,4
26,5
Eosinofile
68,1
53,9
51,3
Basofile
131,4
107,5
107,1
Tabell 1. Total variasjonskoeffisient i % når det er talt 100 celler og 200 celler i ett blodutstryk og 200 celler fordelt
på 2 utstryk.
(Forsætter side 30)
%
XE-2100
