30 |
Klinisk Biokemi i Norden · 1 2020
Eliminering av biotininterferens i immunologiska
analysmetoder baserade på biotin-streptavidintekniken
Sammandrag av examensarbetet för bioanalytikerstuderanden
Riina Vainionpää
Metropolia Yrkeshögskolan, Helsingfors
Biotininterferensen i metoder som
använder sig av biotin-streptavi-
dintekniken inverkar på olika sätt
beroende på om mättekniken är
kompetitiv (t. ex. Progesteron) eller
immunometrisk/sandwich (t. ex.
Anti-Müllerskt hormon, AMH). I
en kompetitiv metod tävlar det fria
biotinet med biotin-märkt antikropp från att bindas
till streptavidinet varvid mätsignalen sjunker och
man får ett felaktigt förhöjt resultat. I en sandwich-
metod däremot får man ett felaktigt för lågt resultat.
I examensarbetet framställdes två serier prover
med ökande koncentrationer biotin. Den ena serien
bestod av en proteinbuffert och från den mättes pro-
gesteron. Den andra serien var en serumpool från
redan analyserade AMH-prover. Efter de inledande
bestämningarna valdes ett prov med betydande
interferens ut. Sedan framställdes ett flertal liknande
prover till vilka pipetterades olika mängder paramag-
netiska streptavidinytbelagda partiklar, vilka inklu-
derades med provet. Därefter separerades partiklarna
är det viktigt att ha en god dialog med vårdgivare
och patienter för att förhindra felaktiga testresul-
tat. I samband med provtagning bör man fråga om
patienten tar biotin eller ett biotininnehållande pre-
parat. Det saknas i dag tyvärr information om hur
länge man behöver hålla upp med biotinintaget före
provtagning för att förhindra felaktiga testresultat.
Utbilda vårdgivare om biotininterferens för de
analyser som används i ditt laboratorium. Det dag-
liga rekommenderade intaget av biotin är 0,03 mg för
vuxna och dessa biotinnivaer orsakar vanligtvis inte
storningar. Tillskott som innehåller höga biotinni-
våer inklusive de som marknadsförs för hår, hud och
naglar kan dock innehålla upp till 20 mg biotin, och
läkare kan rekommendera upp till 300 mg per dag
vid tillstånd sommultipel skleros. Biotinnivåer högre
än det rekommenderade dagliga tillåtet kan orsaka
felaktiga analysresultat för tester som är baserade på
biotinteknologi. Prover från patienter som tar höga
halter biotin kan innehålla mer än 100 ng biotin/ml.
Koncentrationer av upp till 1200 ng biotin/ml har
påvisats i prover från patienter som tar upp till 300
mg biotin per dygn.
Var medveten om att biotininterferens problemati-
ken ännu inte har åtgärdats för en del troponinana-
lyser. Se FDA information om Biotininterferens med
Troponin analyser.
FDA rekommendationer till tillverkare av
laboratorietester:
Om din analys använder biotinteknologi, kontakta
FDA för att diskutera biotininterferens.
Undersök störningar från biotin (upp till minst
1200 ng biotin / ml prov) i dina analyser som använ-
der biotinteknologi. Bestäm den lägsta koncentra-
tionen av biotin som kan orsaka kliniskt signifikant
störning av dina tester. Kommunicera med dina
kunder som kanske inte är medvetna om att ditt test
använder biotinteknologi och hur det kan påverka
analysresultaten.
FDA listar i sin information ett antal troponin
metoder som fortfarande har biotinproblem. De flesta
av metoderna finns sannolikt inte i Norden men FDA
anger fortsatta problem med troponin metoder från
Roche, Siemens och Ortho vilket ju är tillverkare som
finns på den nordiska marknaden.
