Klinisk Biokemi i Norden Nr 2, vol. 10, 1998 - page 14

frem for alt at ciEF er meget velegnet til neonatal
screening ved å bruke blod spots på filtrerpapir.
Konklusjonen er at ciEF bestemmelse av Hb vari–
anter er en metodikk som mange klini ske labora–
torier vii kunne dra nytte av i tiden fremover.
4.3.1 HbAlc
målinger har v<ert nyttet i mer enn
20 år til kontroll av diabetes pasienter. En rekke
ulike rutinemetoder nyttes, men til nå er det ingen
av disse som oppfyller de internasjonale krav som
stilles til en referanse metode. Nylig publiserte
Kobold og medarbeidere (20) en analyseteknikk,
som kommer til å bli IFCC's referansemetode for
HbA l c. Kort skissert starter man med erythrocyt–
ter som hemolyseres, og endaproteinase G
l
u-C til–
settes for å spalte betakjeden slik at man får beta–
N-terminale hexapeptider av HbAlc og HbAO.
Disse peptidene separeres og måles kvantitativt på
to måter: a) med HPLC-massespektrometri eller
b) med HPLC-CE. Begge er kandidater til refe–
ransemetode, og evalueres for tiden av IFCC Wor–
king Group on HbA l c Standardization (se ref.20).
4.4 Lipoprotein analyse
Lipoprotein analyser og triglycerid bestemmelse
utfl')res som kjent i et betydelig arrtall i alle klinisk
kjemiske laboratorier i forbindel se med evaluering
av risikofaktorer for hjerte/kar sykdom. Metoder
til målingav totalkolesterol, HDL, LDL samt apa–
proteiner utfl')res med tildeles hl')yt automatisert
utstyr. I de senere årene er man imidlertid blitt klar
over at de tradisjonelle lipoprotein klassene består
av flere undergrupper (for eksempel HDL2 og
HDL3, tette LDL partikler, etc.) som kan ha be–
tydning for utvikling og forståelse av kardio–
vaskul<er sykdom. Flere forskningsgrupper utvik–
ler nå CE-metodikk tillipoproteinanalyser, og re–
sultatene ser lovende ut. Den prinsipielt enkleste
metoden er beskrevet av Schmitz og medarbeide–
re (21) . Lipoproteinene merkes fl')rst med et fluo–
rescerende fargestoff (NBD-ceramide) fl')r sepa–
rasjon med ciTP, som gir 9 hovedfraksjoner. HDL
separeres i 3 hovedgrupper: En hurtig migrerende
HDL som inneholder hovedsakelig apo A-l og
fosfatidylcholin; En noe mer langsom fraksjon som
bes år av partikler rike på kolesterol, apo A-II, apo
E og apo C; og den siste HDL fraksjonen består av
apo A-1, apo A-IV og LCAT. CE/ciTP separerer
chylomikron, VLDL, IDL og LDL i flere fraksjo–
ner. Schmitz og hans gruppe ved klinisk kjemisk
48
avde)jng, Regensburg universitet, konkluderer med
at analytisk ciTP er et verdifullt verktl')y til rask
(separasjonstid 6 min), pålitelig, og automatisert
bestemmelse av lipoprotein-profiler i det kliniske
laboratorium.
MaefarJane og medarbeidere (22) har under ut–
vikling et meget avansert system for lipoprotein
analyse hvor CE spiller en sentraJ rolle. Program–
met nytter både ultrasentri fugering, SDS-CE ana–
lyse og CE-elektrospray massespektrometri og gir
detaljert informasjon både om intakte lipoprotei–
ner og apoproteiner. Deler av dette komplisene
systemet nyttes nå ved Scott & White Memorial
Hospital i Texas til utredning av risikopasienter
for hjerte/kar sykdom.
4.5 DNA analyser
Et felt hvor CE spiller en stadig stl')rre rolle, er til
DNA analyser. Man nytter CE istedenfor den tra–
disjonelle polyacrylamid gel elektroforesen. Ek–
sempelvis er CE noe brukt i det humane genom–
prosjektet til effektiv sekvensering. CE nyttes også
til separasjon av PCR produkter og kan brukes i
mutasjonsanalyser (23). En anvendelse som kan
v<ere av interesse for klinisk kjemi, er apo E typ–
ing ved hjelp av CE analyse av restriksjonsfrag–
menter.
4.6 Homocystin
0ket serumnivå av aminosyren homocystin er i de
senere årene funnet å v<ere en risikofaktor for trom–
boseutvikling. Den mest brukte metode til å måle
homocystin har v<ert HPLC, etter frigjl')ring av pro–
teinbundet homocystin og derivatisering. Det er
nylig beskrevet en metode (24) som nytter CE is–
teden for HPLC. lmidlertid er det nå utvikJet im–
munkjemiske metoder, som trolig vil erstatte kro–
matografi og elektroforese.
4.7 Uorganiske ioner
Bestemmelse av totalt og ionisert Ca og Mg ved
bruk av CE (25,26) har vist seg å gi gode resulta–
ter. Resultatene er samsvarende med resultatene
man finner ved bruk av ionespesifikke elektroder
for ionisert kalsium, og atom absorpsjon for total–
kalsium. Seprasjon av mange uorganiske kationer,
NH4+, Na+, Li+, Ca++ og Mg++ har også blitt
vist ved bruk av indirekte UV-deteksjon (27).
Imidlenid er det lite sannsynlig at CE til måling
Klinisk Kemi
i
Norden2. 1998
1...,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13 15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,...36
Powered by FlippingBook