34 |
Klinisk Biokemi i Norden · 2 2015
Vitamin K-beroende Protein C – ännu något konstigt
Johan Stenflo
Institutionen för Laboratoriemedicin Malmö, Universitetssjukhuset MAS. Lunds Universitet.
Protein C – vad är det?
År 1974 hittade jag av en händelse
ett plasmaprotein som, liksom
de K-vitaminberoende koagula-
tionsfaktorerna VII, IX, X och
protrombin, binder kalciumjoner.
När vi bestämde proteinets N-ter-
minala aminosyrasekvens fann vi
den K-vitaminberoende aminosyran gamma-kar-
boxyglutaminsyra (Gla) – men sekvensen skiljde sig
från de övriga proteinerna (Fig. 1). Den enda rimliga
förklaringen var att vi hade hittat ett tidigare okänt
K-vitaminberoende protein. Då jag inte visste något
om proteinets funktion var det svårt att ge det ett
namn. Till slut döpte jag det till Protein C eftersom
det vid reningen hade eluerats i topp C vid den sista
kromatografin (1,2).
Året därpå tillbringade jag, tillsamman med famil-
jen, vid University of Wisconsin i Madison, som är
beläget ett par timmars bilresa nordväst om Chicago.
I Madison hade jag förmånen att kunna ägna en stor
del av min tid åt Protein C. Vid hemkomsten visste
jag att Protein C, liksom t.ex. koagulationsfaktorerna
protrombin och VII, IX och X, är ett proenzym till ett
serinproteas (3). Plasmakoncentrationen av Protein C
är ungefär 4 mg per liter medan koncentrationen av
den aktiva formen (APC) bara är knappt 1 mikro-
gram per liter. Nu vet vi att vi utan detta mikrogram
APC drabbas av dödliga venösa tromboser inom lop-
pet av en halvtimme (4).
Jag ville veta mer om Protein C och bestämde mig
för att bestämma dess aminosyrasekvens, vilket på
den tiden var ett projekt på ett par år. För att kunna
rena fram tillräckligt med Protein C för sekvens-
ningen skulle vi behöva uppemot hundra liter plasma.
Det var alltså otänkbart att använda human plasma,
varför vi fick hålla oss till den bovina formen.
cDNA sekvensning var inte aktuellt då den ännu
inte var etablerad vid Malmölaboratoriet. Det fanns
dessutom goda skäl som talade för proteinsekve-
Fig. 1. Figuren visar sekvensen hos de K vitaminberoende koagulationsfaktorernas drygt 40 N-terminala aminosyror. Som
framgår av figuren är sekvenslikheten påfallande. De röda
g
står för Gla. Det framgår också att alla nio till elva N-terminala
Glu är karboxylerade till Gla och att det inte finns någon konserverad sekvens runt de Glu som blir karboxylerade (till skill-
nad från t.ex. de prolin som hydroxyleras i kollagen). Det förklaras av att det N-terminalt om Gla peptiden finns en så kallad
propeptid (ej med på bilden), som binds till enzymet varefter alla närliggande Glu karboyleras. Omedelbart innan sekretio-
nen från hepatocyten klyvs propeptiden bort.
