Apo E är ett vitt spritt apolipoprotein och torde
ha ett flertal funktioner utanför lipoprotein–
omsättningen. Ett exempel på detta är att apo E
synes vara inblandat i läkningsprocessen efter
vävnadsskador, och även rapporterats ha betydelse
för immunoreglering och modulering av celltillväxt
och celldifferentiering(16). Apo E syntetiseras i
nervsystemet, och man har spekulerat i att det kan
ha funktioner vid nervskada och nervregeneration.
En intressant iakttagelse i detta sammanhang är att
E 4 nyligen visats vara överrepresenterat hos pa–
tienter med Alzheimers sjukdom(17). Det kan där–
för inte uteslutas att genetisk variation av apo E kan
ha betydelse även för andra funktioner än
lipoproteinmetabolismen.
Mot denna bakgrund har ett ökande kliniskt
intresse för apo E-typningar noterats. Metodologiskt
kan dettagöras såväl med analys av proteinisoformer
av apo E (s k fenotypning) eller med DNA-analys
(s k genotypning).
Vidfenatypning
separeras de
olika apo E-isoformerna med isoelektrisk fokuse–
ring, utnyttjande laddningsskillnaderna mellan de
olika apo E-varianterna. Vanligtvis görs detta di–
rekt från plasma med hjälp av dubbel antikropps–
teknik(12,13). Detta fungerar efter viss vanamycket
väl men enligt vår erfarenhet är det närmast ound–
gängligt att använda en E 2/2-homozyot som mar–
kör. Vid
genatypning
undersöks vanligen det cen–
trala partiet av apo E-genen som innehåller de
vanligastemutationerna. Enmycket användbartek–
nik för detta är PCR-amplifiering av det centrala
fragmentet av apo E-genen åtföljt av digestion med
restriktionsenzym(18). Man kan då detektera alla
olika isoformer med hjälp av restriktionsfragment–
mönstret (se exempel i
Fig.
3). Vanligtvis ger dessa
tekniker identiskt svar, men i speciella fall med
mutationer utanför den centrala apo E-genen som
samtidigt resulterar i laddningsskillnader kan skill–
nader i resultaten erhållas. Vi har såväl vid Klin
kemlab, Huddinge Sjukhus somvid Kliniskkjernisk
avdelning vid Rikshospitalet erfarenhet av dessa
metoder och sedan något åringår de i laboratoriernas
arsenal främst för utredning av hyperlipidernier. Vi
vill dock betona att analysen kan ha ett växande
intresse även utanför detta traditionella område,
inte minst mot bakgrund av den mycket starka
ålderspåverkan på frekvenserna av apo E–
isoformerna samt de relativt färska fynd som finns
om inverkan av apo E-variation även på andra
sjukdomar.
3/3
4/3
2/2
4/2
3/3
4/3 4/3
ST 3/3 3/3
4/3
3/3
4/3
3/3
Apo E
genotype
Figur 3.Typiskt resultat från genatypning med restriktionsfragmentmönsrer.
Klinisk
umi
i
Norden 3. 1993
29
