![]()
19
| 4 | 2009
Klinisk Biokemi i Norden
(Fortsætter side 20)
Tabell 1. Identifierade prostasom proteiner med antikroppssvar
i sera från patienter med förhöjda PSA-värden.
Det är sedan tidigare känt att stressproteiner är upp-
reglerade i samband med cancer. Ett av de vanligast
förekommande identifierade prostasomautoantige-
nen var clusterin. Clusterin tillhör gruppen stresspro-
teiner och har tillskrivits en rad egenskaper i normala
fysiologiska processer och sjukdomstillstånd, bland
annat i samband med prostatacancer. Clusterin har
också tillskrivits både pro- och antiapoptotisk funk-
tion genom olika splicing-former. Därför undersökte
vi i delarbete 2 anticlusterin autoantikroppstitrar
hos prostatacancerpatienter och hur dessa korrele-
rade med etablerade måttstockar för prostatacancerns
framväxt. Vi såg att anticlusterin titern ökade med
ökad prostatastorlek och vi såg också ett inverterat
samband mellan titrarna och metastasering till lymf-
körtlar.
Mass
(Da) Protein namn
89819 Transitional endoplasmic reticulum ATPase
71082 Heat shock cognate 71 kDa protein 8
70294 Heat shock 70 kDa protein 1
33073 F-actin capping protein alpha-1 subunit
33536 Chromosome 17 open reading frame 25
36997 Clusterin
36761 Alcohol dehydrogenase [NADP+]
32595 Syntenin 1
26642 Prostate specific antigen
22783 Heat-shock protein beta-1
24904 Peroxiredoxin 6
20588 Lactoylglutathione lyase
45294 Semenogelin I ?
15805 Superoxide dismutase [Cu-Zn]
16572 Prolactin-inducible protein [Precursor]
19891 DJ-1 protein
Kliniskt-patologiska variabler versus serum antikroppstiter
n
rs-värde
p-nivå
Transrectal ultraljudsvolym av transition zone
214
0.17
0.015
Transrectal ultraljudsvolym av totala prostatan
304
0.13
0.021
Lymfkörtel metastas (endast 11 patienter hade denna diagnos)
161
-0.16
0.047
IgG anti-prostasom antikroppar ( IgG-APA)
391
0.14
0.007
Dessutom fanns ett starkt samband mellan anticluste-
rin titer och antiprostasom titer och detta kan tolkas
som att clusterin är ett viktigt antigen i prostasomen.
Clusterin-titern hos kontrollerna var också hög, vil-
ket var förbryllande.
I delarbete 3 valde vi att närmare undersöka
prostasomers association till nukleinsyra. Tidigare
undersökningar hade indikerat att DNA på något
sätt kunde vara kopplat till prostasomer och en första
rening av seminalt prostasomalt DNA visade frag-
mentstorlekar från ungefär 13 kilobaspar (kbp) och
nedåt med urskiljbara band vid 2 och 1 kbp.
Motsvarande framrening av prostasomalt DNA från
PC3-cell prostasomer uppvisade fragment av likar-
tade storlekar men utan banden vid 2 och 1 kbp. Pro-
stasomer inkuberade med DNas visade ingen frag-
mentering tydande på insides lokalisation av DNA i
prostasomer. För att närmare undersöka identiteten
av det prostasomala DNA:t klonades 13 fragment
Tabell 2. Korrelationen mellan anticlusterin antikroppstitrar och olika prostatacancervariabler visade signifikanta korrelationer i
tre fall.
Figur 2. Seminalt prostaso-
malt DNA separerat på 1%
agarosgel. DNA-fragmenten
visar på en storlek från c:a
13 kilobaspar och nedåt.
Man kan också se två band,
ett vid 2 kilobaspar och det
andra vid 1 kilobaspar.
