![]()
19
Klinisk Kjemi i Norden 2, 2002
Rörlighetsstimulerande effekt på kryo-
förvarade spermier
Möjligheten att uppnå befruktning och därmed
grunden för graviditet ökar med antalet rörliga
spermier som kan nå och interagera med oocy-
ten efter inseminering. Kryoförvaring av sper-
mier leder i allmänhet till en 40 %-ig minskning
i rörlighet och en 10-15%-ig mindre chans till
graviditet jämfört med värden för färsk sperma.
Användningen av ett ART (assisted reproduc-
tive technology) program med kryoförvarade
spermier är därför begränsad på grund av dåligt
utbyte av rörliga spermier från tinade prov.
I avhandlingen undersöks möjligheterna att
öka återvinningen av frysförvarade och tinade
spermier genom att berika swim-up mediet med
prostasomer och några andra effektgivare (albu-
min, glukos och adenin). Resultaten visar att
swim-up media, berikade med prostasomer,
hade en överlägsen effekt på utbytet av rörliga
spermier och gav en 50%-ig ökning jämfört
med motsvarande konventionella swim-up
media utan tillsats av prostasomer.
Resultaten visar att prostasomer ökade rörlig-
heten hos frysta-tinade spermier dramatiskt och
tillskott av prostasomer i swim-up media kan
därmed vara fördelaktigt att ge med förbättrade
resultat vid inseminering av kryoförvarade
spermier.
Prostasomliknande granula från prostata-
cancercellinjen PC-3 ökar rörligheten på
tvättade spermier och binder till spermien
Prostatacancercellinjen PC-3, har visats sig
innehålla prostasom-liknande granula. I av-
handlingen genomförs en studie för att jämföra
dessa PC-3 prostasomer med seminala prosta-
somer när det gäller deras rörelsebefrämjande
effekt på tvättade spermier. Vi använde Compu-
ter assisted sperm analysis (CASA) för att på ett
objektivt sätt bestämma spermiens rörlighetspa-
rametrar samt immunfärgning av prostasomer
för att lokalisera dessa till spermien. Resultaten
visar att tillsats av PC-3 prostasomer ökade
antalet rörliga spermier från ca 12% till 50-
70%. Den optimala proteinkoncentrationen av
dessa prostasomer var 0,1 mg/mL och värme-
behandling av PC-3 prostasomerna minskade
inte deras rörlighetstimulerande effekt. Immun-
färgning med en monoklonal anti-prostasom
antikropp visade att PC-3 prostasomer och
seminala prostasomer band till spermien.
Infärgningen, som förekom över hela spermien,
var intensivast på mellanstycket och svagare på
spermiehuvudet.
Vi drar slutsatserna att PC-3 prostasomer
besitter funktionella likheter med seminala
prostasomer vad gäller rörlighetsbefrämjande
effekt med lika lokalisering/bindning till sper-
miekroppen.
Antibakteriell aktivitet hos humana
prostasomer
Mot bakgrund av kunskapen att kromogranin B,
som finns i seminala prostasomer, innehåller en
peptidsekvens som kan vara bakteriecid har vi i
detta arbete studerat prostasomernas effekt på
bakterietillväxt. Antibakteriell aktivitet fast-
ställdes genom tillväxthämning av bakterier i
ett odlingsmedum berikat med prostasomer,
inkubering och inokulering gjordes på odlings-
plattor. I försök med Bacillus megaterium följ-
des effekten ultrastrukturellt med scanning
elektron mikroskopi och atomic force mikro-
skopi. Resultaten visar en dos-beroende och
mycket distinkt hämning av vissa bakteriers till-
växt vid låga prostasomkoncentrationer (20
mg/mL). Denna koncentration representerar
bara ca 5% av prostasominnehållet i ett normalt
ejakulat. Denna distinkta hämning avtog vid
inkubering med värmebehandlade prostasomer
(80°C) vilket kan tyda på en effektor av
proteinnatur. Ultrastrukturellt, kunde man se en
ökad oregelbundenhet och ökad fragmentering
av bakterierna med tiden. Av 10 testade bakteri-
estammar sågs en fullständig tillväxthämning
hos 4, medan de övriga 6 stammarna var
opåverkade.
Slutsatsen blir att prostasomer eller prosta-
som-härledda proteiner/peptider kan ha anti-
bakteriella effekter på vissa bakteriestammar.
Prostasomer kan vara antigen för cirkule-
rande humana anti-spermieantikroppar
Närvaron av naturligt förekommande anti-sper-
mie antikroppar (ASA) är en välkänd orsak till
