13
| 3 | 2012
Klinisk Biokemi i Norden
(
Fortsætter side 14)
større rutinelaboratorier i ind- og udland. LC-MS/
MS-baserede metoder kører imidlertid endnu ikke
rutinemæssigt på automatiserede platforme, og MS/
MS-baserede metoder er ofte både tids- og plads-
krævende. Derimod er det med disse metoder muligt
at analysere mange steroider i én prøve samtidigt
–
såkaldte multiple LC-MS/MS-metoder. En del af
de anvendte LC-MS/MS-metoder til bestemmelse af
androgenmetabolitter er dog stadig upublicerede in-
house-metoder. Sammenligning af T-koncentrationer
målt med henholdsvis immunanalyse og LC-MS/MS-
metode viser dog utvetydigt, at immunanalyser har en
tendens til at overestimere T i det lave område (dvs.
hos børn, kvinder og hos mænd med hypogonadisme)
med fejlagtig konklusion af forhøjet T til følge (11).
En androgenstatus analyseret ved hjælp af LC-MS/
MS-teknikken udføres enkelte steder i Danmark,
blandt andet på Statens Serum Institut. På Afdeling for
Vækst og Reproduktion, Rigshospitalet, er androgen-
status-analysen med isotopfortyndet turboflow-LC-
MS/MS ligeledes indført med henblik på etablering af
et pædiatrisk normalmateriale baseret på et studium
af raske børn og unge (12,13). Metoden er baseret på
en oprensning af serumprøver, hvor interne standarder
(
deuterium- eller carbon13-mærkede steroider) tilsæt-
tes. Ved hjælp af turboflow-LC oprenses og adskilles
steroiderne kromatografisk, hvorefter de analyseres
ved hjælp af MS/MS. I massespektrometret ioniseres
steroiderne, som efterfølgende isoleres på baggrund
af deres specifikke molekylmasse igennem flere trin.
Ratioen mellem analyt og intern standard sammen-
holdes med passende standardkurver for de enkelte
steroider, og ved hjælp af lineær regressionsanalyse
bestemmes koncentrationen af de enkelte steroider i
en serumprøve, Figur 2.
Klinisk anvendelse
En androgenstatus anvendes hyppigst ved udredning
og behandling af følgende kliniske tilstande i binyrer
og gonader:
1.
Pubertas præcox og varianter heraf (præmatur
adrenarke)
2.
Enzymdefekter i binyrerne (AGS)
3.
Androgenproducerende tumor i binyrer eller ovarier
4.
Hyperandrogenisme hos piger og kvinder (hirsu-
tisme, polycystisk ovariesyndrom [PCOS])
5.
Hypogonadisme hos mænd
Figur 2. Selected Reaction Monitoring (SRM) massespektra
af dehydroepiandrosteronsulfat (DHEAS), androstendion
(
Adion), testosteron (T), 17α-hydroxyprogesteron (17-OHP)
og dehydroepiandrosteron (DHEA) i serum. RT: retentionstid.
