![]()
22
| 3 | 2009
Klinisk Biokemi i Norden
(Fortsat fra side 21)
findes så multiple antistoffer mod neutrofilocytters
kerne- og cytoplasmabestanddele. I disse patienter
danner NSA ofte cirkulerende immunkomplekser
med reumatoide faktorer (2, 8). Ligeledes ser man
hos nogle patienter med ulcerøs kolit (specielt i kom-
bination med scleroserende kolangit) ANCA rettet
mod kathepsin G eller laktoferrin, men disse kan
ikke isoleret anvendes som markører for sygdommen
p.g.a. deres spredte forekomst også ved andre kronisk
inflammatoriske tilstande. Også her udgør de blot en
lille del af de forekommende NSA.
Tabel 1 opsummerer forekomst og hyppighed af
ANCA og NSA ved en række kronisk inflammato-
riske sygdomme, samt de mest kendte antigener mod
hvilke disse er rettede.
Strategi ved undersøgelse
for NSA og ANCA i laboratoriet
Ved international konsensus er det vedtaget, at
ANCA skal defineres som neutrofilocytspecifikke
autoantistoffer ved undersøgelse med indirekte
immunfluorescens(IIF)-teknik kombineret med
påvisning af antistoffer rettet specifikt mod et granu-
lumprotein (9, 10).
Indirekte immunfluorescensteknik
Den vedtagne teknik til påvisningen med IIF blev
beskrevet i 1988 under den første internationale
workshop om ANCA og vaskulitter i København
(11). Her anbefaledes brug af vaskede ”buffy coat”
celler fra normale donorer som substrat og IgG-
specifikt konjugat som detektionsantistof. I tiden
herefter har kommercielle firmaer imidlertid produ-
ceret substrater bestående af isolerede neutrofilocyt-
ter, hvorved aflæseren af IIF-reaktioner ikke direkte
kan se, om en positiv reaktion er specifik for neu-
trofilocytter/ monocytter som oprindeligt anbefalet.
En række andre substrater såsom HEp-2 celler eller
vævssnit benyttes i stedet for buffy coat lymfocytter
til at udelukke forekomst af ANA resp. non-ANCA
antistoffer mod cytoplasma. Fig. 1 illustrerer princip-
pet i bestemmelsen af NSA/ANCA ved IIF-teknik.
Fig. 2 og 3 illustrerer IIF-fund af klassisk vaskulit-
associeret ANCA rettet mod PR3, resp. mod MPO.
Det lidt ejendommelige billede af MPO-antistoffets
reaktion med cellekerner og disses nære omgivelser
skyldes et artefakt betinget af brugen af ætanol til
fiksering af cellerne på glas (1).
Figur 1
. Princip i IIF-bestemmelse af IgG-klasse ANCA/NSA
på ætanol fikseret, blandet leukocytsubstrat.
Figur 2
. Typisk C-ANCA. Hvid pil viser negativ lymfocyt,
hvilket bestyrker at antistoffet er neutrofilocytspecifikt.
Figur 3
. Typisk P-ANCA. Hvid pil viser negativ eosinofil
leukocyt. Lymfocytter er i dette billede usynlige.
