Klinisk Biokemi i Norden Nr 3, vol. 2, 1990 - page 23

else för detta problem. Tillrättaläggande kom i
vissa fall omgående men det finns fortfarande
en bit kvar att gå.
Man kan hoppas att kalibreringsproblemen
kommer att lösas i och med att den nya inter-
Kvalitetssäkring av HbA
1
c
JAN-OLOF JEPPSSON
Klinisk kemi, Allmänna sjukhuset,
S-21401 Malmö
HbA
1
c
är idag en etablerad markör vid meta–
bolisk kontroll av framför allt insulinberoende
diabetes. Användning av den glykerade for–
men av hemoglobin i detta sammanhang har
varit känd sedan 1975 . Ett stort antal metoder
har använts med varierande framgång. I dag
är jonbytarkromatografi (HPLC) tillsammans
med affinitetskromatografi dominerande där
den förra metoden numera ökar i popularitet
på bekostnad av andra metoder. Orsaken är
bl. a. jonbytarkromatografins bättre precision
och avsaknad av batch till batch variation
samt lättheten att automatisera, vilket är någ–
ra av affinitetskromatografins nackdelar (l).
De två metoderna mäter helt olika saker: Affi–
nitetskromatografi ger totalmängden glykerat
hemoglobin dvs. glykeringen av aminosyran
lysins sidokedjor, medan HbA
1c
definieras
som glykering av den N-terminala aminosyran
valin i molekylens P-kedjor. I dagarna lanseras
en tredje princip: en ELISA-metod baserad på
en monoklonal antikropp (Novo Nordisk Di–
agnostics Ltd, Cambridge, UK) speciellt rik–
tad mot den glykerade N-terminala peptiden.
Preliminära försök visar mycket god överens–
stämmelse med jonbytarkromatografi och en
acceptabel inom- och mellanserieprecision.
ELISA-metoden kalibreras mot HPLC-jonby–
tarkromatografi och har fördelen att den är
helt specifik för HbA
1
Kliniker har ett flertal gånger vid olika sym–
posier och i enkäter efterlyst större samstäm-
Klinisk kemi
i
Norden
nationella interimistiska matrix referenspre–
parationen från IFCC introduceras 1991. Där–
emot kvarstår i övrigt ovan nämnda faktorer
som problem i samband med analys av CRP.
Arbetet kan börja!
mighet mellan olika laboratorier vid analys av
HbA
1
c.
SFKK:s proteingrupp har därför tagit
upp HbA
1
c
i sitt kvalitetssäkringsprogram i
likhet med många andra europeiska länder.
Vid Sigtunamötet redovisades första årets re–
sultat ink!. en enkät samtidigt som vi kom
överens om att gemensamt införa flera modi–
fieringar, vilket skall leda till en förbättrad
analyskvalitet i framtiden.
Metoder
En enkät innefattande uppgifter om metodval,
instrumentering, kvalitetssäkring och refer-
FÖRENKLAD HbA1c·ANALYS 1990 (Mono S jonbytare)
Modifiering av: CLINICAL CHEMISTRY 32 (1986) 1867
17 111
centrifugerade blodkroppar
+
900
11!
citratlfoofat, pH 5.4
(0.02 M Na-citrat, 0.055 M Na-foofat, 0.1% Triton)
j
lnkubera 30 min, 37
•c
(hämolyo och eliminering
av preHbA 1 c>
Centrifugering 3000 rpm, 15 min
HPLC
j
Kontrollera färgen
viouellt (Hb 4-8 g/l)
A:0.02 M Malonat, 0.02%
Na-azid, pH 5.7. Gradient
A
+
0.185 M NaCI
Flöde: 3 mi/min, 11 min gradient
21
1...,13,14,15,16,17,18,19,20,21,22 24,25,26,27,28,29,30,31,32,33,...36
Powered by FlippingBook