Klinisk Biokemi i Norden Nr 4, vol. 17, 2005 - page 5

8
| 4 | 2005
Klinisk Biokemi i Norden
Bakgrund
Vätskekromatografi-masspektro-
metri (liquid chromatography-
mass spectrometry, LC-MS) är
i dag en av de mest effektiva
analytiska metoderna för kvali-
tativ och kvantitativ bestämning
av flera olika slag av moleky-
ler. Vanligen används en tan-
dem masspektrometer (MS/MS), som möjliggör
fragmentering av valbara molekyler och kvantite-
ring av fragmenten. Ett litteratursök på metodbe-
skrivningar från de senaste fem åren i tidskriften
Clinical Chemistry visar att LC-MS/MS är starkt på
kommande i kliniska laboratorier. Antalet artiklar,
i vilka man har använt LC-MS/MS har ökat från
sex år 2001 till 22 år 2004 och trenden förefaller
fortsätta.
LC-MS har hittills främst använts för diagnostik
av metaboliska sjukdomar hos nyfödda. Inom medi-
cinindustrin är den en rutinmetod för bestäming av
läkemedel och deras metaboliter, men allt fler kli-
niska laboratorier bestämmer speciellt immunsup-
pressiva medel såsom takrolimus, sirolimus, eve-
rolimus och syklosporin med LC-MS/MS. Metoden
används även i ökande grad för bestämning av
katekolaminer och deras metaboliter (adrenalin,
noradrenalin, 5-HIAA, HVA, VMA, metanefriner).
Under den senaste tiden har LC-MS alltmer bör-
jat användas för bestämning av steroidhormoner,
såsom androgener, kortikosteroider och estrogener
samt homocystein och metylmalonsyra. LC-MS
används även för analys av proteiner, och karak-
terisering av hemoglobinvarianter med MS är nu
en snabb och enkel metod. MS är även en lovande
referensmetod för kvantitativ bestämning av protei-
ner i serum och urin, men praktiska tillämpningar
låter ännu vänta på sig.
Orsakerna till att LC-MS/MS vinner terräng är
flera – användning och service har blivit enklare
och priserna har sjunkit drastiskt. En användbar
apparatur kostar dock ännu över 200 000 euro
men MS/MS är ändå ett reellt alternativ för allt
flera laboratorier. De tekniska egenskaperna har
utvecklats, och uppfattningen att masspektrome-
triska metoder är svåra och arbetsdryga är därför
föråldrad. Utveckling av metoderna kräver visserli-
gen specialkunnande, men att underhålla en färdig
applikation är relativt lätt. Då derivatisering av pro-
vet sällan är nödvändigt är förbehandlingen föga
tidskrävande, och därför tävlar LC-MS framgånsrikt
med automatiska immunoanalysatorer för ett flertal
bestämningar. Fastän anskaffnings-kostnaderna är
höga är användningen billig på grund av ringa
reagenskostnader. Hittills har bristen på kunniga
masspektromister varit en flaskhals, men i och med
att apparaterna blir allt vanligare torde situationen
förbättras
(1)
.
Bestämning av steroidhormoner
Utvecklingen av kommersiella immunologiska meto-
der för bestämning av steroider under det senaste
decenniet har inte enbart medfört fördelar. På
grund av kravet på automatisering har man frångått
extraktion och kromatografisk rening av proverna
och förkortat inkubationstiderna. Analytiken har
blivit snabb och reproducibiliteten god men specifi-
citeten och känsligheten har minskat samtidigt som
inverkan av störande komponenter har ökat. Det är
genant för oss kliniska kemister att detta kunnat
pågå så länge, men under den senaste tiden har
man börjat fästa uppmärksamhet vid steroidmeto-
dernas bristfälliga validering
(2)
. Nya immunmetoder
har sällan jämförts med referensmetoder utan med
andra immunologiska metoder, och därför har de
automatiska immunologiska metodernas ofta kata-
Bestämning av steroider med vätskekromatografi-tandem-
masspektrometri (LC-MS/MS)
Esa Hämäläinen, Ursula Turpeinen och Ulf-Håkan Stenman
Laboratoriet vid Helsingfors Universitetscentralsjukhus och Institutionen för klinisk
kemi, Helsingfors Universitet. E-post: esa.hamalainen@hus.fi
1,2,3,4 6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,...36
Powered by FlippingBook